酶联免疫吸附测定，酶联免疫吸附测定原理

酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种广泛应用于生物医学领域的技术，它利用抗原抗体反应的特异性，结合酶促反应放大信号，实现对目标分子的定性和定量检测。小编将详细介绍ELISA的工作原理、类型及其在免疫学中的应用。

1.ELISA的工作原理

ELISA的工作原理是将可溶性的抗原或抗体结合到固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应。具体步骤如下：

1.固相载体包被：将已知抗原或抗体包被在固相载体（如聚苯乙烯微孔板）上，形成固相抗原或抗体。

2.样品加入：将待测样品加入微孔板中，若样品中含有目标抗原或抗体，则会与固相载体上的抗原或抗体结合。

3.洗涤：去除未结合的样品和其他杂质。

4.酶标记：加入酶标记的抗体（或抗原），若样品中的抗原（或抗体）与固相载体上的抗原（或抗体）结合，则酶标记的抗体（或抗原）也会与之结合。

5.底物显色：加入底物，酶催化底物反应产生颜色变化，颜色深浅与目标分子浓度成正比。

2.ELISA的类型

ELISA可分为以下五大类：

-直接ELISA：直接使用酶标记的抗体与抗原结合，检测抗原。

间接ELISA：先使用抗原与固相载体结合，再使用酶标记的抗体与抗原结合，检测抗原。

双抗体夹心ELISA：使用两个抗体分别与抗原结合，检测抗原。

竞争性ELISA：待测抗原与酶标记的抗原竞争固相载体上的抗体，检测抗原。

sandwichELISA：使用两个抗体分别与抗原结合，形成夹心结构，检测抗原。

3.ELISA在免疫学中的应用

ELISA在免疫学领域具有广泛的应用，以下列举几个例子：

-病***检测：如HIV、乙肝病***等。

肿瘤标志物检测：如甲胎蛋白（AF）、癌胚抗原（CEA）等。

药物浓度检测：如抗生素、激素等。

疾病诊断：如糖***病、心***病等。

酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种灵敏、特异、高效的检测技术，在生物医学领域具有广泛的应用。通过了解ELISA的工作原理和类型，有助于更好地运用这一技术为科研和临床实践服务。