培养基，培养基的配置

培养基简介

培养基是微生物、细胞等生物体外生长繁殖的必需物质，其质量直接影响到实验结果的准确性和可靠性。小编将详细介绍培养基的配置过程，包括液体培养基和固体斜面培养基的配置方法，以及配制过程中需要注意的细节。

1.液体培养基与固体斜面培养基的配置

液体培养基

液体培养基一般装4-5ml，约占试管高度的1/4。这种培养基适用于微生物的液体培养，便于观察微生物的生长情况。

固体斜面培养基

固体斜面培养基一般装3-4ml，约占试管高度的1/5。这种培养基适用于微生物的固体培养，便于观察微生物的菌落形态。

2.分装与包扎

分装时，应将培养基按照所需量分装到试管中。液体培养基一般装4-5ml，固体斜面培养基一般装3-4ml。

分装好后，塞上棉塞，用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水分进入，使棉塞弄***。

按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。一般培养基用1.05kg/cm²，121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。

灭菌注意事项

-灭菌温度过高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基中的某些不耐热物质遭到破坏。 灭菌过程中，长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏，如使糖类物质形成氨基。

4.配制溶液

向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解。

对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解。加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。

配制固体培养基

先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全溶解。

5.质量控制

脱水培养基

脱水培养基的质量控制，主要关注水分活度、H值、营养成分等方面。

配制与灭菌

为了保证培养基按照配方配制准确，配制容器和水要求不得带入其他物质。配制完成后，进行灭菌处理。

6.细胞培养环境

CO2浓度

在细胞培养过程中，环境二氧化碳浓度是一个关键参数，因为它会直接影响大多数细胞培养基的H值。培养箱内的CO2浓度应尽可能维持在恒定水平（最常用浓度为5%CO2）。

7.微生物培养基配置步骤

准确称量试剂

根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。

将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度。常用8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1NHCl调节H值。

8.倒平板

培养皿容积

以90mm培养皿为例，其直径为90mm，内高度约为14-15mm（未详细测量），可容纳约100mL水（实际测量）。在倒平板时，大约需要20-25mL的培养基。

倒平板操作

将灭菌后的培养基倒入培养皿中，均匀铺开，待凝固后，即可用于微生物的接种培养。