透射电镜制样是材料科学和生物学研究中不可或缺的一环,而染色剂的选择则直接影响着样品的观察效果。以下是对透射电镜制样时常用的染色剂的详细介绍。
1.制样材料的选择
一般制样选用普通碳膜铜网/微栅铜网即可。若颗粒直径小于10nm,则需使用超薄碳膜制样。对于含有Cu的样品,拍摄EDS能谱和maing可选镍网或者钼网。若样品含C,且颗粒大于100nm,则可选微栅网。
对于磁性样品,请务必提前确定机时,要求颗粒大小不超过200nm,且不接受自发申请。2.染色剂种类
四甲基罗丹明-5-异硫氰酸(TMRITC)
TMRITC是一种荧光染料,属于罗丹明家族。其结构特点是在罗丹明骨架的5号位上连接了四甲基异硫氰酸基团。这种染料常用于荧光标记和细胞染色。
IR808染料
IR808染料在蛋白与核酸标记、基因测序、动物活体成像以及临床造影等领域得到广泛应用。在生物医学领域,它还被用作光学成像剂,靶向特定组织或细胞,并在应用NIR808nm激光时触发按需释放。
Hoechst33258
Hoechst33258染色是一种常用的细胞核染色方法,能够为细胞核提供蓝色荧光信号。这种染色技术广泛应用于细胞计数、细胞周期分析、凋亡检测以及细胞形态观察等实验中。
台盼蓝染色技术常用于细胞活力和细胞膜完整性的检测。实验流程包括试剂准备(台盼蓝溶液、S缓冲液)、样本准备(细胞或组织切片)以及染色和观察。3.染色注意事项使用国产防脱片时,轻脂油可能会粘附在切片上,导致试剂无法完全覆盖,从而产生假阴性结果。为解决这个问题,罗氏诊断产品有限公司推荐在切片脱蜡后,将切片浸泡在10%雀巢牛奶水溶液中10分钟,然后进行检测。
4.样品制备透射电镜要求样品非常薄(通常小于100纳米),因此需要使用离子束切割、机械研磨、聚焦离子束等技术进行超薄样品制备。
通过以上对透射电镜制样常用染色剂的详细介绍,相信读者对这一领域有了更深入的了解。在实验过程中,正确选择染色剂和制备方法对于获得高质量的观察结果至关重要。
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